细胞毒性试验-细胞毒性试验流程-中科检测

细胞毒性试验是一种检测化学物质对人体健康影响的方法，通过检测人体细胞（如肝细胞、神经细胞或免疫细胞）在接触化学物质后的死亡或受损数量，来评估化学物质的毒性。细胞毒性试验是一种重要的安全评估工具，可以帮助确定化学物质对人体健康的影响，并帮助确定其安全剂量和浓度。

细胞毒性试验方法主要有以下几种：

MTT检测法：MTT检测法是利用MTT作为电子接受体，在生物体内脱氢酶的作用下发生还原反应，生成蓝紫色结晶物，这些结晶物在570~650nm波长处有吸收峰，而在490nm波长处无吸收峰，因此可以用570~650nm波长处的光吸收值表示MTT的还原程度，光吸收值越大，说明细胞活力越强。

CCK-8检测法：CCK-8检测法也是一种酶联免疫吸附测定技术，与MTT检测法类似，通过检测还原物来检测细胞活力。

荧光素发光法检测（ATP发光法）：ATP是细胞内的能量货币，ATP的含量与细胞数量和细胞活力有关。ATP发光法通过检测ATP的发光量来检测细胞活力。

LDH法检测：LDH是细胞膜完整性的指标，当细胞受到损伤时，LDH会从细胞内释放出来，因此可以通过检测LDH的活性来检测细胞毒性。

细胞毒性试验流程可以分为以下几个步骤：

预实验：收集对数生长期细胞，根据细胞扩增传代时的细胞生长速度同比例计算出细胞生长84小时后汇合度达到****时的细胞铺板密度，然后以之作为中心密度，以1.25倍为梯度，往前/往后各梯度稀释4个密度，种到实验所用类型的细胞板中。

实验：将待测样品按预实验的实际实验过程模拟给药(同比例加入溶媒的培养基)，37℃5%CO2培养箱培养72小时后加CCK8试剂，37℃5%CO2孵育1~4小时后测定OD值。

计算细胞存活率：通过CCK8试剂的吸光度值来计算细胞存活率。

判断细胞毒性：根据细胞存活率判断细胞的毒性。