微核试验-微核试验方法-中科检测

微核试验是染色体或有丝分裂器损伤的一种遗传毒性试验方法、微核试验是利用啮齿类动物骨髓嗜多染红细胞(PCE)制成涂片,于显微镜下观察PCE中的微核,是遗传毒性试验方法中比较敏感的检测方法之一。

微核试验方法包括以下步骤:

微核试验的方法

动物体内细胞微核:主要有骨髓嗜多染红细胞微核试验;外周血淋巴细胞微核试验

细胞培养微核试验

蚕豆根尖微核试验:实验所用的蚕豆为松滋青皮豆,通过浸种、催芽、染毒、恢复培养、固定、孚尔根染色等步骤后,进行镜检、

微核试验流程包括以下步骤:

选取饱满均匀的蚕豆种子,洗净后放入盛有蒸馏水的烧杯中,置于25℃培养箱内,光照/黑暗为12h/12h,浸泡24h,此期间至少换水2次。

种子吸水膨胀后,用脱脂棉纱布包裹置于解剖盘内,保持湿度,催芽12~24h。

待种子初生根露出2~3mm时,选取发芽良好的种子继续发芽。

再经36~48h,种子大部分初生根长至2~3cm,每处理选取6~8粒初生根尖生长良好、根长一致的种子,放入装有被测液的培养皿中浸泡24h,浸泡液没过完整根尖即可。

将处理后的种子,用蒸馏水浸洗3次,每次2~3min,然后放入铺好湿润脱脂棉的解剖盘,按上述培养条件使根尖细胞恢复24h、

将恢复后的种子从根尖顶端切下1cm长的幼根放入青霉素空瓶中,加卡诺氏固定液(无水乙醇∶冰醋酸=3∶1)固定24h、

用蒸馏水处理对照组,方法相同。

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